脂質(zhì)納米顆粒(LNP)在 mRNA疫苗中發(fā)揮了重要的作用。此外，許多臨床前和臨床研究也表明LNP在核酸治療領(lǐng)域有著巨大的潛力。LNP的諸多結(jié)構(gòu)及生物學(xué)特性并不僅僅歸因于單一的脂質(zhì)成分，而是各類脂質(zhì)的組合。因此，本文將著重描述不同的脂質(zhì)成分在LNP制備中的作用。

可電離的陽(yáng)離子脂質(zhì)通常有一個(gè)叔胺，它在中性條件下脫質(zhì)子化，在低于脂質(zhì)酸解離常數(shù)(pKa)的pH條件下帶正電荷。陽(yáng)離子脂質(zhì)有兩個(gè)關(guān)鍵的功能：一是促進(jìn)LNP中的核酸包封；二是介導(dǎo)核內(nèi)體膜破壞，使核酸釋放到細(xì)胞質(zhì)中。此外，陽(yáng)離子脂質(zhì)也能在核內(nèi)體攝取中發(fā)揮重要作用：或直接通過(guò)某些脂質(zhì)上的正電荷與帶負(fù)電荷的細(xì)胞膜之間相互作用，或通過(guò)與支持細(xì)胞攝取的血漿蛋白結(jié)合發(fā)揮作用。

PEG脂質(zhì)的選擇極大地影響LNP的大小、穩(wěn)定性、體內(nèi)分布和轉(zhuǎn)染效率等關(guān)鍵特性。在LNP制備和存儲(chǔ)過(guò)程中，PEG脂質(zhì)通過(guò)提供空間屏障來(lái)穩(wěn)定其結(jié)構(gòu)，既能驅(qū)動(dòng)自組裝又能防止顆粒聚集。圖2的電鏡圖中不難看出，當(dāng)PEG脂質(zhì)占比提升時(shí)，LNP的粒徑有較明顯的下降。此外，PEG脂質(zhì)在一定程度上控制LNP的循環(huán)時(shí)間及其與細(xì)胞間的相互作用。選擇哪一種PEG 脂質(zhì)高度取決于治療目的、靶器官和/或細(xì)胞類型以及給藥途徑，并應(yīng)考慮構(gòu)成脂質(zhì)尾巴的烷基/酰基鏈的摩爾比和長(zhǎng)度，研究表明這些參數(shù)都會(huì)影響LNP的關(guān)鍵特性。

膽固醇在細(xì)胞膜中的作用很大程度上取決于具體情況。當(dāng)與具有低凝膠-液晶相變(Tm)的脂質(zhì)結(jié)合時(shí)，膽固醇有助于形成液序相，其特征是膜流動(dòng)性降低、雙分子層厚度增加(圖3)，膽固醇和低Tm脂類發(fā)生“凝結(jié)"，因此脂類和膽固醇的橫截面積低于單個(gè)橫截面積的總和。然而，當(dāng)與高Tm脂質(zhì)結(jié)合時(shí)，膽固醇提高膜流動(dòng)性并使雙分子層變窄。在這兩種情況下，膽固醇都會(huì)將脂質(zhì)拉向液體狀態(tài)。另外，膽固醇可顯著減少LNP表面結(jié)合蛋白的數(shù)量，并改善循環(huán)半衰期。因此，相對(duì)于內(nèi)源性膜，LNP配方中含有等量的膽固醇可以防止凈流出或流入，并保持膜的完整性。

中性脂質(zhì)又稱為輔助型脂質(zhì)，常見(jiàn)的有DOPE、DSPC、DOPC等。與其他組分相比，針對(duì)中性脂質(zhì)的研究相對(duì)較少，其在配方中的占比為總脂質(zhì)的10%?20%。中性脂質(zhì)常作為L(zhǎng)NP配方的結(jié)構(gòu)脂質(zhì)，因?yàn)樗鼈兛梢宰园l(fā)地組織成脂質(zhì)雙層，且較高的相變溫度可增強(qiáng)LNP的膜穩(wěn)定性，與之相對(duì)應(yīng)，LNP在內(nèi)涵體逃逸時(shí)，其又能破壞內(nèi)涵體穩(wěn)定性，提高核酸遞送效率。中性脂質(zhì)通常是半合成的，例如，磷脂酰膽堿通常來(lái)源于蛋黃和大豆等天然原料，并且可以進(jìn)行化學(xué)修飾(如增加脂肪酸尾巴)。

參考文獻(xiàn)：

1. Hald Albertsen C, Kulkarni JA, Witzigmann D, Lind M, Petersson K, Simonsen JB. The role of lipid components in lipid nanoparticles for vaccines and gene therapy. Adv Drug Deliv Rev. 2022 Sep;188:114416. doi: 10.1016/j.addr.2022.114416. Epub 2022 Jul 3. PMID: 35787388; PMCID: PMC9250827.

靶點(diǎn)科技攜手美國(guó)BroadPharm，為脂質(zhì)體制備和多種形式的PEG提供綜合解決方案，多選擇的產(chǎn)品。可以定制大規(guī)格和技術(shù)服務(wù)。